1 什么是微生物检验

【查看证书】微生物即个体无法运用肉眼观察的微小生物总称；一般微生物涵盖细菌、真菌、病毒、立克次体、少数藻类等。对人类产生最重要的影响之一的微生物，也会导致传染病形成。有50%的人类疾病引起原因为病毒。微生物十分微小，需运用显微镜放大约千倍才能观察到。例如1000个中等大小的细菌相叠加后的大小如同句号。由于微生物具有致病性，可导致皮革、布匹、食品等发霉腐烂，然而微生物也有益处，早期有研究者发现，从青霉菌对其它细菌生长抑制中发现青霉素，对于医疗领域而言属于跨时代发现。部分微生物被广泛应用于各种酶制剂、食品、生产乙醇、工业发酵等，还有处于高盐、低温、高温、高辐射、高碱等极端环境中微生物，正因微生物特殊性，凸显微生物检验重要性。

2 微生物检验流程

一般微生物检验流程有以下步骤：①标本采集：根据患者症状以及规章制度正确采集标本，及时将采集到的标本送至检验科行接种处理，在运送标本中保持相应温度与氧气，防止标本干燥；②镜检：检验人员运用显微镜直接观察标本，辨别相关致病菌形态与数目，以及初步判断标本。必要时还需对标本行染色后再观察，可对致病菌性质、来源进行鉴别，更能排除污染因素，使标本致病菌检出率得到大幅度提升。③分离培养：采集标本中不可避免会吸附细菌，若在镜检环节发现标本上吸附的细菌，就需对标本实施分离纯化并将其接种于显色培养基、血平板培养基、营养琼脂培养基等适宜培养基上，再将空气与温度调整至适合细菌生长数值，获得便于进一步鉴定细菌。④细菌鉴定：检验人员通过细菌形态、菌落特点、酶类检测、血清学试验、生化反应等方式鉴定分析分离获得的标本，明确致病原因。⑤药敏试验：检验人员对分离致病菌行体外抗菌药物敏感性试验，预测其治疗作用，明确相关细菌耐药性，协助医生在临床诊断治疗中针对部分感染性疾病时采取合适药物，提升临床疗效。⑥报告：要求在24h内出具镜检报告，在24h内或次日出具初步鉴定与直接药敏结果；通常最后鉴定与细菌药敏结果不超过3d，除血培养外，任何一项送检标本需均在24h内预报。微生物检验工作急需解决的问题之一即报告出具缓慢，无法满足相关方面需求。所以，在未来需要不断更新技术，提升微生物检测报告出具效率。

3 微生物检验常见问题

3.1 涂片镜检结果与培养结果不吻合？

涂片镜检结果是针对所有检见病原菌检测出具报告，旨在检出致病菌，所以会出现不一致现象。部分苛养菌需在培养基或特殊环境下生长，常规培养方式不一定获得结果。

3.2 今日培养结果与前一日不同？

需要观察取材是否相一致；对于痰标本需要选取优势菌行鉴定药敏，那么就有可能出现两次结果不一致现象。

3.3 选取药敏报告敏感药物，为何临床治疗无效？

一般体外药敏试验仅能对体内治疗效果进行预测，耐药等于治疗无效，敏感不等于治疗有效；或可能并非真正的致病菌；或细菌自身因素，如生物被膜或诱导耐药等；药敏试验中部分药物单独使用无疗效，可与其他药物联合使用。

4 影响微生物检验因素

4.1 检验人员素质

在微生物检验中，检验人员工作能力发挥不可小觑作用，甚至对微生物检验结果产生直接影响。一般从事微生物检验工作人员需具备微生物及相关专业专科以上学历，或具备10年以上微生物检验工作经历。所以，微生物检验人员需具备扎实的专业理论知识与检验技能。与此同时，检验人员还需了解相关政策与法律法规，明确微生物检验标准以及各种标准适用对象及范围，最大程度保障微生物检验结果有效且准确。

4.2 检验环境因素

所谓检验环境即开展微生物检验的软件管理、硬件设施等实验场所。其中硬件设施需与微生物检验条件要求相符，物流与人流分离且呈单向流原则；无菌区的天花板、墙、桌椅表面、地面保持光滑状态，便于擦拭和消毒。必要时在无菌区域安装高效层流过滤装置，使无菌操作区干净清洁得到保障。与此同时，需在辅助区与实验区设置相应强度的紫外灯对检测区域进行消毒灭菌。软件管理需遵循《检测与校准实验室能力通用要求》相符，在实验室设置单独专业的生物安全监督员与安全责任人并明确其职责与作。定期组织实验室工作人员参与继续教育与培训计划，例如常规微生物无菌操作、检验、生物安全柜维护、生物防护等一系列专业知识培训，并通过内部能力验证、质量控制、实验间对比等方式不断强化实验室质量管控。

4.3 仪器设备因素

微生物检验不仅要在合格检验环境由高素质且专业的检测人员开展，还需为微生物检验配备满足检测工作要求仪器设备，例如显微镜、移液器、均质器、冰箱、培养箱、高压蒸汽灭菌锅等。冰箱、培养箱、高压蒸汽灭菌锅等主要仪器设备需充分考虑控温范围、用途、数量要求、控制精度等，每年定期对仪器设备校准，定时对环境条件进行监控记录，促使检测结果有效溯源。

4.4 操作因素

微生物检验人员需树立无菌操作意识，遵循无菌操作原则。工作人员进入无菌室后需佩戴无菌手套和身着无菌工作服，在生物安全柜中操作时不仅要穿戴无菌手套与工作服，还需运用75%酒精和紫外线对操作环境消毒，并尽可能在15min内完成同一样品操作。（孙小召 汝阳县人民医院 检验科）